Guía
- Los colorantes son sustancias capaces de ceder o transmitir su color a otras.
- Los colorantes pueden ser según su estructura química :
- 1-Ácidos, básicos y neutros
- Colorantes ácidos son los que la propiedad colorante radica en el ion con carga negativa, por lo que se llaman aniónicos
- En los básicos ,por el contrario , el Ion coloreado es el positivo , siendo llamado cationico.
- Los colorantes neutros son una sales complejas de un colorante ácido y un básico
Las coloraciones son intercambios iónicos entre el colorante y la bacteria.
Pasos previos a toda coloración
- Hacer un frotis dejar secar y fijar.
- Frotis: Dispersar el material bacteriológico en un porta objetos
- Secar: Dejar expuesto al aire
- Fijar: pasar tres veces por el calor del la llama del mechero ( para evitar que se desprenda durante los lavados).
- También se puede utilizar licor de Hoffman.
La coloración de Gram. es positiva compuesta y diferencial
Coloración de Gram. Hacer un frotis dejar secar y fijar
Paso 1.- Cubrir la preparación con Cristal Violeta por 60 seg. y lavar suavemente con agua.
Paso 2.- Cubrir la preparación con Yodo-Lugol por 60 seg y lavar suavemente con agua.
Paso 3.- Cubrir la preparación con Alcohol-Cetona durante algunos segundos (15 seg) y lavar suavemente con agua. O dejar caer gotas sobre el porta objetos hasta que las gotas salgan incoloras.
Paso 4.- Cubrir la preparación con Safranina por 60 seg y lavar suavemente con agua.
Secar y Observar en 100x (con aceite de inmersión).
Esquematizar los resultados de la coloración de Gram.
Forma_______________Disposición__________________
y propiedad tintorial________________
La coloración de Gram es positiva, compuesta y diferencial
| Colorantes y reactivos | Gram+ | Gram- |
| 1-Cristal violeta 1 minuto y lavar con agua | | |
| 2-Lugol 1 minuto y lavar con agua | | |
| Alcohol acetona 15 segundos y lavar con agua . | | |
Safranina 1 minuto se lava con agua se deja secar y se observa al microscopio Resultados Bacteria teñidas de morado Gram+: bacterias ricas en acido teicoico Bacterias teñidas de Rojo: Gram-ricas en Lipido | | |
- Colorantes de Gram Cristal Violeta y Safranina.
- reactivos :Yodo-Lugol
- Solvente: Alcohol-Cetona.
Coloración de Ziehl Neelsen
Positiva compuesta y diferencial
| Colorantes | BAAR | BAANR |
| Fuscina básica Se le da calor hasta que emitan vapores y se lavan. | | |
| Alcohol ácido (decolorante) Tres minutos y lavar con agua | | |
| Azul de metileno 1 minuto se lava con agua se deja secar y se observa al microscopio. | | |
Resultados Bacteria teñidas de rojo: bacterias ricas en ceras no saponificables y ácidos mícólicos .BAAR Bacterias teñidas de azul: BAANR | | |
Coloración de Cápsula
La tinta china o la nigrosina dan un fondo oscuro sobre el cual la cápsula de terminados microorganismos como el Cryptococcus neoformans se observará como un halo claro alrededor del microorganismo.
Método con tinta china (Método de Gin)
Técnica
- - Colocar una gota de la sol. De dextrosa en un portaobjetos.
- -Tomar una pequeña cantidad del material bacteriológico del cultivo y mezclar con la gota de dextrosa, colocar una gota de tinta china y mezclar con el extremo de un portaobjetos.
- - Hacer un frotis delgado y secar al aire, fijar con alcohol metílico por un minuto.
- -Teñir por 2 minutos con Cristal violeta.
- -Lavar con abundante agua, secar y observar al microscopio.
- Esquematice la coloración de cápsula
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